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加葡萄糖(处理③)。在基础配方中添加牛肉膏和蛋白胨后,虫草生长与只添加无机盐相比没有明显差别,推测牛肉膏和蛋白胨提供的主要营养物质———磷酸盐、碳源、氮源和维生素在磷酸二氢钾和硫酸镁存在的情况下已并非限制性因子,即达到了营养饱和。因此再添加并不能有促进生长作用,反而由于添加物质过多导致培养基缝隙过密,不利于出草。处理⑤和处理⑥的无机盐和葡萄糖添加量相等,但分别添加了牛肉膏和蛋白胨,虫草生长出现统计学差异,这可能是由于牛肉膏和蛋白胨分别添加导致培养基中C:N比例改变,牛肉膏中提供大量碳源,而蛋白胨提供大量氮源,而只有在合适的C:N前提下,虫草子实体才能正常生长[7]。在葡糖糖提供了足够碳源的基础上,培养基中添加蛋白胨更适合虫草生长。在大米培养基中只添加有机质(处理②),虫草的生长和只添加无机盐相当,因此,在实际生产中,性质稳定而价格较低的无机盐更为实用。
免疫调节作用灵芝抱子在传统中药中用来调节免疫系统已有较长历史.Pan等閔观察灵芝抱子多糖对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发胃癌大鼠的免疫性和抗氧化活性的影响发现,给予患胃癌大鼠灵芝抱子多糖后,可以降低血清和胃组织中脂质过氧化产物水平,并使胃癌所致的血清SOD、CAT和GSH-Px水平趋于正常,表明灵芝抱子多糖具有一定的免疫调节作用和抗氧化作用.实验发现,灵芝抱子可以提高ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强SR-BC诱导的小鼠足肿胀,增加溶血空班数等,表明灵芝抱子主要通过作用于免疫细胞增强其活性,从而直接或间接调节机体免疫功能.抗氧化作用灵芝的抗氧化作用与多糖有关,并与多糖的单糖组成、分子量有较大关系.Heleno等28在对灵芝不同部位多糖的提取中发现,灵芝菌丝体中提取的多糖含量高,灵芝抱子中提取的多糖抗氧化活性好,其DPPH率为0.15mg/mL,还原能力为0.69mg/mL,均比其他部位提取的多糖抗氧化能力强.Deepalakshmi 实验发现灵芝抱子的乙醇提取物表现出强烈的抗氧化活性,其体外抗氧化活性显示,灵芝抱子的乙醇提取物对ABST、DPPH、OH-、O2-的体外能力均较抗坏血酸低,但相差不大.
四、混合料的加入与比例混合料是填充袋内段木与段木之间的主要物质,它是灵芝菌丝体初的营养源。其配方为:阔叶木屑75%、细米糠或麦麸21%、白糖或红糖1%、石膏1%、硫酸镁0.1%、合成色素0.3%、合成蛋白胨0.54%、灵芝生物素0.06%、腐质土1%,料水比为5:5。将硫酸镁、生物素、色素、合成蛋白胨、白糖溶入水中,与上述原料拌匀,填入已装好段木的栽培袋中,注意段木与段木之间的空隙一定要填实,料面超出段木面2厘米即可封袋,并立即进入灭菌程序。五、灭菌灭菌可采用高压或常温蒸笼,无论采用哪一种灭菌,都要考虑料之间的水蒸气流通,以收到充分灭菌的效果,采用高压灭菌的,升火前应打开放气阀门,当水蒸气大量喷发时,关闭放气阀,加大火力,当压力表盘为0.15帕次放气时开始计时,在此气压下持续4个小时即可停火。当压力表降至0帕时,打开放气阀排气,把压力锅门打开自然降温。采用常用灭菌的,在蒸笼底部一角放一支温度计,升火后温度至100°C时开始计时,维持12个小时后停火,闷上一夜,然后打开蒸。
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